医疗器械产品注册证代理机构-ALDH2基因分型IVD试剂上市现状与注册审评问题分析

一、背景介绍

　　乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase，ALDH) 是一种催化乙醛以及其他脂肪族醛氧化的四联体蛋白酶。目前，已发现至少有19种ALDH同工酶，研究较为深入的主要有线粒体同工酶ALDH2。

　　ALDH2基因位于人类第12号染色体，含有13个外显子，ALDH2基因具有遗传多样性，在不同的地域、民族、人种中其频率不同。其在欧美白种人中少见，而在东亚黄种人中突变率较高。在东亚人群中ALDH2基因有一个常见的变异位点G1510A（rs671，常表示为ALDH2*2），该突变位点导致504位的谷氨酸被赖氨酸替换（Glu504Lys）。正常的ALDH2等位基因记为ALDH2*1，突变的等位基因记为ALDH2*2。

　　ALDH2基因可编码由517个氨基酸残基组成的蛋白质，该基因编码的线粒体乙醛脱氢酶是抗心绞痛急性发作药物硝酸甘油的重要代谢酶，乙醛脱氢酶具有硝酸酯酶活性，可将硝酸甘油代谢为具有药理活性的一氧化氮。硝酸甘油作为治疗心绞痛的基本药物之一广泛用于临床，研究发现硝酸甘油的舒血管作用通过释放NO所介导。但该药的临床有效性常因人而异，部分病人舌下含服硝酸甘油不能迅速有效地缓解心绞痛，使心肌严重缺血加重。研究表明，携带ALDH2*2等位基因的个体代谢硝酸甘油的能力下降，硝酸甘油抗心肌缺血的效应减弱。药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南中明确指出，携带ALDH2*2等位基因的心绞痛患者尽可能改用其他急救药物，避免硝酸甘油舌下含服无效。

二、常用检测方法

　　近年来分子生物学技术发展迅速，PCR扩增技术应用广泛，该技术灵敏度高，特异性好，具有良好的临床应用前景，尤其在基因多态性检测方面具有优势。ALDH2基因多态性常用的检测方法有：PCR-基因芯片法、PCR-荧光探针法、PCR-熔解曲线法和PCR-电泳分析法等。

三、目前已批准ALDH2基因多态性检测试剂概况

　　我国已有多个ALDH2基因多态性检测试剂获得批准上市，部分产品还处于在审状态。目前已批准产品的方法学以PCR-荧光探针法为主，其中部分产品采用PCR熔解曲线法、PCR毛细电泳片段分析法以及DNA微阵列芯片法，目前以PCR-飞行时间质谱法作为方法学的检测试剂还处于在审阶段。样本类型以全血为主，2023年批准了一款以人口腔黏膜脱落细胞作为样本的检测试剂。

四、对我国ALDH2基因多态性检测试剂审评的思考

　　随着技术的不断发展，新技术新方法不断涌现，对于ALDH2基因多态性检测试剂而言，虽然已上市产品积累了一定的技术基础，但尚存在产品设计开发过程不规范，性能验证以及确认过程不全面等问题。不同企业在产品研发过程中对产品的认识程度不一，在企业参考品设置、交叉干扰物质研究等方面存在较多问题，接下来我中心将基于科学合理的原则，制定相关产品的指导原则，为申报企业从产品研发、生产至注册申报阶段提供更为全面的指导，为技术审评提供参考依据。